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【预习检查】检查学生自主学习情况，督促学生充分利用课外时间先入为主，实现先学后教，为课堂进行探究性学习留下足够的时间。
1、简述基因工程的概念。
基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，通过体外DNA重组和转基因技术，赋予生物以新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，又叫做DNA重组技术。
2、简单罗列基因工程概念中的关键词。
提示：意愿、设计、体外、重组、创造、分子水平。
3、列举基因工程的基本工具名称。
【自主学习】对学习一般性的概念、性质和定理及其直接的应用性问题，引导学生自主学习、自主消化，教师引导、巡查，对自主学习有困难的学生进行帮助或指定学生帮助。
1.“分子手术刀”——限制性核酸内切酶（限制酶）
（1）来源：主要是从微生物中 分离纯化出来的
（2）功能：能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性。
（3）结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式即黏性末端和平末端。
2.“分子缝合针”——DNA连接酶
(1)两种DNA连接酶（E·coliDNA连接酶和T4-DNA连接酶）的比较：
①相 同点：都缝合磷酸二酯键。
②区别：E·coliDNA连接酶来源于T4噬菌体，只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来；而T4DNA连接酶能缝合两种末端，但连接平末端的之间的效率较低。
(2)与DNA聚合酶作用的异同:DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已 有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键。DNA连接酶是连接两个DNA片段的末端，形成磷酸二酯键。
3.“分子运输车”——载体
（1） 载体具备的条件：
①能在受体细胞中复制并稳定保存；
②具有一至多个限制酶切点，供外源DNA片段插入；
③具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择。
（2）最常用的载体是质粒,它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌染色体之外，并具有自我复制能力的环状DNA分子。
（3）其它载体：λ噬菌体衍生物、动植物病毒
【合作学习】对学生不能自主掌握的重要概念、性质和定理，不能独立完成实验操作；不能独立解决的问题组织学生合作学习，教师帮助小组长组织合作学习，对合作的结果，根据教师提问，小组长回答，小组成员补充展示，及时加分奖励。
1、举例或设想出一些限制酶，要求其识别序列为4、5或8个核苷酸。
2、举例或设计出能够产生相同粘性末端的两种限制酶。
3、一个原核细胞中是否可能存在多种限制酶。
4、限制酶是否也有一般酶所具有的作用特性。
5、DNA连接酶一定是恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键吗？
6、被DNA连接酶连接的分子还能够被原内切酶打开吗？试设计一个例子说明。
7、假设有一种DNA分子上，有一个EcoR1酶切位点，那么此DNA和该限制酶的混合液中，可能存在几种DNA分子片断。
8、限制酶Apal识别序列是GGGCCC,限制酶Smal识别序列是CCCGGG。这能说明什么？
9、设计一个由5个核苷酸组成的限制酶识别的序列。
10、限制酶识别的是单链还是双链序列？
【探究延伸】对技能方法要求高、综合性大的问题鼓励学生进行探究性学习，探究的途径可为解题方法探究，问题变式探究，发散类比探究等加大对学生创新意识和创新能力的培养，教师要求A组学生独立完成，鼓励B、C组学生进行探究，在探究的过程中教师要及时指导，避免学生走弯路，用时过长，探究的结果由A组学生展示，对展示的结果教师要做深度评价
1、限制性核酸内切酶的名字缘由？
2、限制性核酸内切酶能识别和切割单链DNA吗？
3、有没有识别和切割RNA的酶？
4、什么是核酸酶？它在细胞中的作用怎样？
5、DNA连接酶能够连接单链吗？
6、启动子、终止子的意义是什么？
【反馈训练】对课堂教学效果及时检测，测验题目难易程度要适当，对检测的结果教师限时抢答，形式多样，对A组学生抢答的问题加分与其他学生相同。
1、设计一个理想的运载体,要求涉及几种限制酶的切点，并讨论一旦被相应的限制酶切开后，再用连接酶连接，其连接情况会怎样？
2、列举与载体必备的条件，并说出为什么?
3、已知某种限制性内切酶在一线性DNA分子上有3个酶切位点，如图中箭头所指，如果该线性DNA分子在3个酶切位点上都被该酶切断，则会产生a、b、c、d四种不同长度的DNA片段。现在多个上述线性DNA分子，若在每个DNA分子上至少有1个酶切位点被该酶切断，则从理论上讲，经该酶切后，这些线性DNA分子最多能产生长度不同的DNA片段种类数是
A．3 B．4 C．9 D．12
4、用同一种限制内切酶切割的目的基因和运载体（质粒），再用连接酶连接，会产生几种重组质粒？
5、DNA连接酶只能恢复被限制酶切开的磷酸二酯键吗？
6、能识别GAATTC的限制酶能识别CTTAAG的序列吗？
【引导预习】对下节课的学习内容编拟成恰当的问题，要求学生当堂在问题的引导下预习，避免课后预习流于形式，督促学生养成自主学习的良好习惯。
1、如何获取目的基因？
2、如何构建基因文库？
3、了解PCR技术。
4、设计理想的表达载体。
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