一、基因工程的基本操作程序
1.目的基因的获取
(1)通过化学合成法直接人工合成目的基因
①对于比较小的目的基因,在明确脱氧核苷酸序列后,可以通过DNA合成仪直接人工合成。
②全基因或较大基因,使用半合成的方法可以降低成本。
(2)通过基因文库获取目的基因
①基因组文库:是指含有某种生物体全部基因片段的重组DNA的克隆群体。
特点:受体菌群中的不同个体含有该种生物的不同基因拷贝,整个菌群所含有的基因拷贝便可能涵盖了该生物的所有基因。
筛选方法:一般采用核酸探针杂交的方法。
②cDNA文库:从组织细胞中提取mRNA,逆转录成cDNA,与适当载体连接后转化宿主,这种包