多聚酶链式反应扩增DNA片段
知识•巧学
一、PCR原理
1.多聚酶链式反应（又称PCR技术）是一种体外迅速扩增DNA片段的技术，它能以极少量的DNA为模板，在几小时内复制出上百万份的DNA拷贝。
2.用PCR技术扩增DNA时，DNA的复制过程与细胞内DNA的复制过程类似。
要点提示 DNA的两条链是反向平行的。为了明确表示DNA的方向，通常将DNA的羟基末端称为3′端，而磷酸基团的末端称为5′端。DNA聚合酶不能从头开始合成DNA，而只能从引物的3′端延伸DNA链。
辨析比较 DNA聚合酶和DNA连接酶
（1）DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核酸片段的3′末端的羟基上，形成磷酸二酯键；而DNA连接酶是在两个DNA片段之间形成磷酸二酯键，不是在单个核苷酸与DNA片段之间形成磷酸二酯键。
（2）DNA聚合酶是以一条DNA链为模板，将单个核苷酸通过磷酸二酯键形成一条与模板链互补的DNA链；而DNA连接酶是将DNA双链上的两个缺口同时连接起来。因此DNA连接酶不需要模板。
3.在80～100 ℃范围内，DNA的双螺旋结构将解体，双链分开，这个过程称为变性。当温度缓慢降低后，
