DNA的粗提取与鉴定
知识•巧学
一、提取DNA的方法
1.基本思路
利用DNA与RNA、蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面的差异,提取DNA,去除其他成分。
2.DNA的理化性质
(1)DNA的溶解性,DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同,此外,DNA不溶于酒精溶液,但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精。利用上述特点可达到分离DNA的目的。
(2)DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性,蛋白酶能水解蛋白质,但是对DNA没有影响。大多数蛋白质不能忍受60~80 ℃的高温,而DNA在80 ℃以上才会变性。洗涤剂能够瓦解细胞膜,但对DNA没有影响。
要点提示 DNA的溶解度与NaCl溶液浓度的关系:当NaCl溶液浓度低于0.14 mol/L时,随浓度的升高,DNA的溶解度降低;当NaCl溶液浓度高于0.14 mol/L时,随浓度升高,DNA的溶解度升高。
3.DNA的鉴定
DNA遇二苯胺(沸水浴)会染成蓝色,因此,二苯胺可以作为鉴定D.A的试剂。
知识拓展 蛋白质的溶解度与盐溶液浓度的关系:在中性盐溶液中,低浓度时,蛋白质的