1.提取DNA的基本思路
(1)生物大分子的提取:选用一定的物理或化学方法分离具有不同物理或化学性质的生物大分子。
(2)DNA的粗提:利用DNA与RNA、蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面的差异,提取DNA,去除其他成分。
2.提取DNA的原理
(1)DNA的溶解性
①DNA在NaCl溶液中的溶解度(如下图)
DNA在0.14 mol/L NaCl溶液中的溶解度最小,DNA分子析出,其他杂质溶解;当NaCl溶液的浓度高于或低于此浓度时,DNA的溶解度都较高。
②DNA在酒精溶液中的溶解性
DNA不溶于酒精溶液,但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精。利用这一原理,可以将DNA与蛋白质进一步地分离。
(2)DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性
①对酶的耐受性:蛋白酶能水解蛋白质,但对DNA没有影响。
②对温度的耐受性:大多数蛋白质不能忍受60~80_℃的高温,而DNA在80_℃以上才会变性。
③对洗涤剂的耐受性:洗涤剂能够瓦解细胞膜,但对DNA没有影响。
3.DNA的鉴定
在沸水浴的条件下,DNA与二苯胺反应呈现蓝色。