1．(2019·广东汕头质检)某转基因牛的生产技术流程如图。请据图回答下列问题：
(1)利用过程①的方法构建的基因文库是________________(填“基因组文库”或“部分基因文库”)；PCR技术需在一定的______________________中进行；PCR扩增过程经过变性、复性和__________三个步骤。
(2)转入生长激素基因的牛可通过乳腺细胞分泌乳汁来生产人生长激素，过程②中，将目的基因与________________的启动子等调控组件重组在一起构建重组质粒，通过__________________技术将其导入受精卵中，然后利用胚胎工程的_______________________
__________________________________________________(答出2项)技术手段获得转基因牛。
(3)该转基因牛进入泌乳期后，其分泌的乳汁中并未含有人的生长激素，可能的原因是________________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________。
答案 (1)部分基因文库 缓冲溶液 延伸 (2)乳腺蛋白基因 显微注射 早期胚胎培养、胚胎移植 (3)目的基因未成功导入或导入的目的基因未能准确表达
解析 (1)题图显示生长激素基因是通过以mRNA为模板反转录形成的，故通过①过程构建的为部分基因文库。PCR技术需要在一定的缓冲溶液中进行；利用PCR扩增目的基因的过程由高温变性(90～95 ℃)、低温复性(55～60 ℃)、适温延伸(70～75 ℃)三个步骤构成一个循环。
(2)过程②为基因表达载体的构建，若要人的生长激素基因在牛的乳腺细胞中表达并随乳汁分泌出来，需要将人的生长激素基因与乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组在一起构建重组质粒。将目的基因导入动物细胞常用显微注射技术。将导入目的基因的受精卵在体外利用早期胚胎培养技术培养形成早期胚胎，并利用胚胎移植技术将早期胚胎移入母牛体内孕育成转基因个体。
(3)由于构建基因表达载体时载体不一定和目的基因结合，以及在结合目的基因时可能与载体进行了反向结合，所以尽管在导入目的基因后检测到了受体细胞中含有载体，但这样的受体细胞中并不会形成目的基因的产物。综上分析，若该转基因牛进入泌乳期后，其分泌的乳汁中并未含有人的生长激素，可能的原因是目的基因未成功导入或导入的目的基因未能准确表达。
