1.(2019江西临川三模)含有限制酶的细胞中通常还具有相应的甲基化酶,这两种酶对DNA分子有相同的作用序列,但具有不同的催化功能。甲基化酶可以对DNA序列进行修饰,使限制酶不能对这一序列进行识别和切割。回答下列问题:
(1)目前,基因工程中使用的限制酶主要是从 生物中分离纯化获得的,鉴定其化学本质可用 。构建“基因组文库”和“cDNA文库”的过程中需要使用DNA连接酶的是 (填“基因组文库”“cDNA文库”或“基因组文库和cDNA文库”)。
(2)含有某种限制酶的细胞,可以利用限制酶切割外源DNA,但不破坏细胞自身的DNA,其原因可能有① ;② 。
(3)DNA分子复制过程需要引物,引物是一小段 。体外扩增DNA的PCR技术的中文名称是 ,PCR一般要经历三十多次循环,每次循环可分为变性、复性和延伸三步。在循环之前,常要进行一次预变性,以便
。
答案 (1)原核 双缩脲试剂 基因组文库和cDNA文库 (2)细胞自身的DNA分子没有该限制酶的识别序列 甲基化酶对细胞自身的DNA分子进行了修饰 (3)DNA或RNA(核酸) 多聚酶链式反应 增加大分子模板DNA彻底变性的概率
解析 (1)基因工程中常会使用限制性核酸内切酶,而限制性核酸内切酶主要是从原核生物中分离纯化获得的,限制性内切酶的化学本质是蛋白质,故鉴定其化学本质可用双缩脲试剂。在构建“基因组文库”和“cDNA文库”的过程中,所获取的基因都需要导入受体菌中储存起来,因此都需要使用DNA连接酶。(2)对于某种限制酶,如果细胞自身的DNA分子没有该限制酶的识别序列,或者甲基化酶对细胞自身的DNA分子进行了修饰,那么这种限制性酶可以切割外源的DNA,但是不会破坏细胞自身的DNA。(3)DNA分子复制过程的引物是一小段DNA或RNA(核酸)。PCR技术的中文名称是多聚酶链式反应,PCR在循环之前,常要进行一次预变性,以便增加大分子模板DNA彻底变性的概率。
