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高中生物编辑
(中图版)2016-2017学年高中第6章第1节蛋白质的提取和分离检测选修1(生物 解析版)
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  • 资源类别试题
    资源子类章节测试
  • 教材版本中图版(现行教材)
    所属学科高中生物
  • 适用年级高二年级
    适用地区全国通用
  • 文件大小1249 K
    上传用户baibai9088
  • 更新时间2019/12/5 16:16:20
    下载统计今日0 总计32
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资源简介

一、蛋白质分离提纯技术

常用的蛋白质分离提纯技术包括离心技术层析技术电泳技术等。其中电泳技术最为快捷灵敏、简便易行。

二、电泳技术分离蛋白质的原理

1.蛋白质中含有游离的氨基羧基,是两性电解质,在一定pH条件下带有电荷。

2.蛋白质在电场中可以向与其自身所带电荷相反的电极方向移动。

3.蛋白质所带的电荷数越多,移动得越快;电荷数相同时,分子量越小,移动越快。

三、结果分析

不同蛋白质的混合溶液经过同一电场电泳后,会在凝胶上形成不同的带纹每种带纹可能就是一种蛋白质。

四、血清蛋白的提取和分离活动程序

1.点样:取新制血清5微升、质量浓度为0.4/毫升的蔗糖溶液和质量分数为0.1%溴酚蓝指示剂等体积混匀后,用微量加样器吸取5 μL样品加到电泳样品槽的胶面上。

2.电泳。

3.染色:用质量分数为0.05%考马斯亮蓝R250染色液对凝胶进行染色。

4.脱色:用体积分数为7%醋酸溶液对凝胶板进行浸泡漂洗,至底色脱净。

5.制干胶板:将已脱色的凝胶板放在保存液中浸泡3 h4 h后,放在两层透气的玻璃纸中间自然干燥。

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