1.有关平板划线操作正确的是（ ）
A. 将接种环放在火焰上灼烧，直到接种环烧红
B. 打开含菌种的试管需通过火焰灭菌，取出菌种后需马上塞上棉塞
C. 打开皿盖，将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行线，盖上皿盖
D. 经过培养，将在划线的第五区域看到单菌落
【答案】A
【解析】
【分析】
平板划线法是指通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，接种时菌液经过连续划线，由于线条末端细菌的数目比线条起始处要少，菌液中的菌体越来越少，最后得到由单个细菌繁殖而来的菌落。
【详解】A. 实验开始之前首先需要对接种环进行灭菌处理，即将接种环在酒精灯火焰上灼烧直至烧红，A正确；
B. 打开含菌种的试管需通过火焰灭菌，取出菌种后需再次通过火焰，塞上棉塞才可，B错误；
C. 接种时不能打开皿盖，而应将皿盖打开一条缝，将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行线，盖上皿盖，C错误；
D. 由于不知道菌种的起始浓度，因此不能确定一定是在划线的第五区域看到单菌落，可能在第三或第四区域就能看到单菌落，D错误。
